1. 項(xiàng)目背景概述

針對(duì)車(chē)間凍干機(jī)滅菌要求，使其符合2010版GMP規(guī)范，現(xiàn)采用氣化過(guò)氧化氫滅菌技術(shù)對(duì)潔凈艙體進(jìn)行滅菌。

購(gòu)置1臺(tái)博醫(yī)康（BIOCOOL）TL-V100型汽化過(guò)氧化氫滅菌器，用于車(chē)間凍干機(jī)滅菌。進(jìn)行完TL-V100型汽化過(guò)氧化氫滅菌的確認(rèn)后，需達(dá)到預(yù)期無(wú)菌要求。

2. 范圍

本方案適用車(chē)間凍干機(jī)滅菌的凍干機(jī)滅菌。
整個(gè)凍干機(jī)內(nèi)部滅菌中使用過(guò)氧化氫氣體作為滅菌劑，對(duì)凍干機(jī)內(nèi)的空氣及暴露的物體硬表面進(jìn)行滅菌操作，整個(gè)過(guò)程中使用TL-V100型汽化過(guò)氧化氫發(fā)生器以及35%過(guò)氧化氫溶液，對(duì)凍干機(jī)進(jìn)行相關(guān)的滅菌操作。通過(guò)針對(duì)性的滅菌過(guò)程及相應(yīng)的滅菌過(guò)程參數(shù)進(jìn)行滅菌，確認(rèn)凍干機(jī)內(nèi)部區(qū)域及物品的暴露硬質(zhì)外表面過(guò)氧化氫氣體的分布均勻性并達(dá)到6個(gè)對(duì)數(shù)以上的廣譜殺滅效果，對(duì)細(xì)菌芽孢、霉菌等微生物達(dá)到較好的殺滅效果。
本方案旨在證明針對(duì)凍干機(jī)進(jìn)行的過(guò)氧化氫氣體滅菌達(dá)到了預(yù)期的滅菌效果，即滅菌空間氣體分布均勻性好、達(dá)到6個(gè)對(duì)數(shù)的芽孢殺滅效率（嗜熱脂肪芽孢桿菌Geobacillus stearothermophilus，ATCC #12980）。
本設(shè)計(jì)方案遵循SFDA2010版GMP、PDA TR34等技術(shù)要求。
本設(shè)計(jì)方案僅適用于車(chē)間凍干機(jī)的滅菌。
本設(shè)計(jì)方案是根據(jù)用戶需求標(biāo)準(zhǔn)起草。

3.參考標(biāo)準(zhǔn)/指南/文件

?EPA——Material Demand Studies：Materials Sorption of Vaporized Hydrogen Peroxide
?房間內(nèi)空氣及物品細(xì)菌數(shù)量調(diào)查與對(duì)策[J].中國(guó)護(hù)理雜志，2001,36（1）：50-51
?GB 22216-2008 食品添加劑 —— 過(guò)氧化氫
?滅菌技術(shù)規(guī)范 中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部
?AAMI TIR 17 附錄E
?NHSRC building Decontamination Alternatives（實(shí)用建筑物滅菌技術(shù)）
?2010年版藥典 附錄XVII 滅菌法
?YY/T0567.5-2011醫(yī)療保健產(chǎn)品的無(wú)菌加工——在線滅菌
?SFDA 2010版GMP
?GAMP 5

4.設(shè)備說(shuō)明

4.1基本組成

?汽化過(guò)氧化氫氣體發(fā)生器（TL-V100）：1臺(tái)      外形尺寸：( L×W×H) 320mm×270mm×400mm
?數(shù)據(jù)在線打印系統(tǒng)：1套 （標(biāo)配）
?無(wú)線平板控制系統(tǒng)：1套（選配）
?過(guò)氧化氫濃度檢測(cè)系統(tǒng)：1套（選配）
?溫濕度檢測(cè)系統(tǒng)：1套（標(biāo)配）
?數(shù)據(jù)USB輸出模塊：1套（標(biāo)配）
?過(guò)氧化氫殘留檢測(cè)器：1套（選配）
?審計(jì)追蹤：1套（標(biāo)配）

4.2滅菌原理

TL-V100型汽化過(guò)氧化氫氣體發(fā)生器是將濃度為35%食品級(jí)過(guò)氧化氫溶液，通過(guò)汽化器汽化成過(guò)氧化氫蒸汽，將過(guò)氧化氫蒸汽輸送到密閉空間內(nèi)進(jìn)行滅菌，具體原理圖如下：

TL-V100系列工作原理圖

4.3工作過(guò)程說(shuō)明

汽化過(guò)氧化氫發(fā)生器是將濃度為35%的H2O2溶液（即雙氧水），通過(guò)汽化器汽化成過(guò)氧化氫蒸汽，并通過(guò)噴頭直接噴射到密閉空間或通過(guò)管道循環(huán)對(duì)密閉艙體進(jìn)行滅菌滅菌的設(shè)備。
TL-V100汽化過(guò)氧化氫發(fā)生器的工作過(guò)程分三個(gè)階段：
調(diào)節(jié)階段：將過(guò)氧化氫溶液注入汽化器汽化成過(guò)氧化氫蒸汽，并通過(guò)風(fēng)機(jī)輸入到密閉空間內(nèi)，直至達(dá)到預(yù)期的濃度；
滅菌階段：繼續(xù)輸入過(guò)氧化氫蒸汽，并保持預(yù)期的濃度；
排殘階段：停止輸入過(guò)氧化氫蒸汽，通過(guò)使密閉空間內(nèi)的排風(fēng)系統(tǒng)，將過(guò)氧化氫蒸汽循排出，直至密閉空間內(nèi)的過(guò)氧化氫濃度降至允許的范圍內(nèi)。（注：如客戶選配過(guò)氧化氫除殘模塊，可進(jìn)行自動(dòng)除殘，直至密閉空間內(nèi)的過(guò)氧化氫濃度降至允許的范圍內(nèi)）

5.產(chǎn)品描述

5.1 TL-V100產(chǎn)品描述

5.1.1 基本結(jié)構(gòu)描述
（1）外觀
TL-V100型汽化過(guò)氧化氫氣體發(fā)生器整體采用304不銹鋼噴塑工藝，整體視覺(jué)良好并易于清潔。主操作面采用智能控制程序?qū)L-V100型汽化過(guò)氧化氫氣體發(fā)生器進(jìn)行模塊化控制，.可選配無(wú)線平板遠(yuǎn)程控制，同時(shí)在設(shè)備底部設(shè)置有萬(wàn)向腳輪，背面設(shè)有拉桿便于在房間內(nèi)部移動(dòng)。
設(shè)備外部進(jìn)出氣管路均采用標(biāo)準(zhǔn)型接口進(jìn)行，進(jìn)風(fēng)口/出風(fēng)口均采用標(biāo)準(zhǔn)型DN32快裝接口，易于拆裝、更換方便。

TL-V100汽化過(guò)氧化氫發(fā)生器整體示意圖

（2）單片機(jī)控制：
運(yùn)行參數(shù)實(shí)時(shí)顯示；
階段之間自動(dòng)切換；
外形尺寸：（長(zhǎng)×寬×高）320mm×270mm×400mm
重量：20kg

5.1.3公用介質(zhì)參數(shù)
電源：AC220±22V 50Hz±1Hz；

5.1.4性能特點(diǎn)
功率：1800W
空氣流量：大于48m3/h
注射速率：1～10g/min
汽化溫度：≤135℃
載氣過(guò)濾效率：99.9999%
滅菌劑：35%食品級(jí)過(guò)氧化氫溶液
滅菌容積：≤200m3
滅菌效力：對(duì)嗜熱脂肪芽孢桿菌的殺滅能力達(dá)到106
潔凈度：滅菌后，保證潔凈室內(nèi)的無(wú)菌環(huán)境；
分布均勻性測(cè)試：通過(guò)化學(xué)指示劑進(jìn)行密閉空間內(nèi)部布點(diǎn)，確保內(nèi)部VHPS良好的分布均勻性；
工作方式：連續(xù)工作

5.1.5使用環(huán)境
滅菌環(huán)境溫度：≥ 20℃
相對(duì)濕度：≤40% RH
空間密閉性良好

5.1.6安全
設(shè)備外表面溫度較高的部位設(shè)置有明顯的警示標(biāo)識(shí)；
過(guò)氧化氫溶液更換處有明顯的警示說(shuō)明；
控制系統(tǒng)能夠抵抗手持無(wú)線電設(shè)備和設(shè)備周?chē)?米范圍內(nèi)的手機(jī)信號(hào)干擾。

6、滅菌試劑介紹

6.1滅菌劑參數(shù)：

主要成分過(guò)氧化氫35%，具有廣譜殺菌能力，對(duì)細(xì)菌、真菌、放線菌、芽孢、病毒等都有顯著效果。適用于制藥、生物技術(shù)、醫(yī)學(xué)產(chǎn)品生產(chǎn)、實(shí)驗(yàn)室等等，分解后不會(huì)產(chǎn)生任何有害殘留，只有水和氧氣。
2H ₂O₂=2H₂O + O₂↑
通過(guò)使用空間殘留檢測(cè)儀，采用對(duì)過(guò)氧化氫敏感的檢測(cè)儀，在1小時(shí)除殘后，可驗(yàn)證過(guò)氧化氫殘留量。OSHA（職業(yè)安全與健康標(biāo)準(zhǔn)）要求過(guò)氧化氫殘留小于1ppm。

6.2生物指示劑品種

嗜熱脂肪芽孢菌片(芽孢數(shù)10的6次方以上)
【產(chǎn)品說(shuō)明】
本品符合 2020 新版《藥典》，采用 Geobacillus stearothermophils (ATCC 12980)作為指示菌，由芽孢鋼片、恢復(fù)培養(yǎng)基、滅菌管構(gòu)成。當(dāng)滅菌合格，經(jīng)培養(yǎng)指示劑顏色保持紫色不變;不合格，則指示劑顏色由紫色變?yōu)辄S色。
【使用范圍】
適用于汽化過(guò)氧化氫空間滅菌效果監(jiān)測(cè)。
【使用方法】
1.在指定位置紙面朝上放置芽孢菌片袋，進(jìn)行滅菌。(或從菌片袋中取出芽孢鋼片，可讓鋼片放置在平皿內(nèi)，將其暴露于各個(gè)滅菌位點(diǎn)，進(jìn)行滅菌，滅菌后立即蓋上無(wú)菌皿蓋。)
2.滅菌處理后，將菌片袋(平皿)移至超凈工作臺(tái)，在無(wú)菌條件下，用無(wú)菌鑷子從菌片袋(平皿)里取出芽孢鋼片，放入同批次配套培養(yǎng)基中(鑷子使用前置于酒精燈外焰處灼燒 2-3s，并遵循一次一消原則，保證鑷子無(wú)菌)。
3.將培養(yǎng)基瓶蓋擰緊后，插入常規(guī)恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，在 55~60℃溫度間培養(yǎng) 24 小時(shí)。
4.陽(yáng)性對(duì)照:從未經(jīng)過(guò)滅菌處理的芽孢菌片袋中取出芽孢菌片放入培養(yǎng)基中，同時(shí)進(jìn)行培養(yǎng)。每次培養(yǎng)時(shí)都必須使用陽(yáng)性對(duì)照。
【結(jié)果判定】
1.培養(yǎng) 24 小時(shí)后觀察，培養(yǎng)液顏色由紫色變成黃色, 說(shuō)明滅菌不完全， 請(qǐng)重新進(jìn)行滅菌。
2.若培養(yǎng)液顏色保持紫色不變, ，則可判斷滅菌完全。
3.只有對(duì)照管生物指示劑的培養(yǎng)液顏色必定由紫色變成黃色呈陽(yáng)性，其生物學(xué)檢測(cè)結(jié)果才算有效。

7.TL-V100汽化過(guò)氧化氫發(fā)生器對(duì)凍干機(jī)滅菌技術(shù)方案

7.1凍干機(jī)滅菌說(shuō)明

艙體的滅菌采用管道循環(huán)滅菌方式。設(shè)備安放示意圖如下：

7.2 滅菌流程說(shuō)明

7.2.1 準(zhǔn)備階段
檢查設(shè)備運(yùn)行環(huán)境及設(shè)備電源等各部正常；
將設(shè)備推入滅菌設(shè)備旁（ 設(shè)備上下延伸管路對(duì)接凍干機(jī)的進(jìn)出口位置）
檢查發(fā)生器儲(chǔ)液瓶中過(guò)氧化氫溶液，佩戴護(hù)目鏡和橡膠手套等必要的防護(hù)后向儲(chǔ)液瓶?jī)?nèi)倒入足量的過(guò)氧化氫溶液。
連接TL-V100汽化過(guò)氧化氫發(fā)生器電源，打開(kāi)電源開(kāi)關(guān) 。
7.2.2 自動(dòng)運(yùn)行階段
7.2.2.1 調(diào)節(jié)階段
將過(guò)氧化氫溶液注入汽化器汽化成過(guò)氧化氫蒸汽，并噴射到凍干機(jī)內(nèi)部，直至達(dá)到預(yù)期的濃度要求；
調(diào)節(jié)階段結(jié)束后，設(shè)備自動(dòng)進(jìn)入滅菌階段；
7.2.2.2 滅菌階段
自動(dòng)調(diào)節(jié)加藥量，繼續(xù)向凍干機(jī)內(nèi)部注入過(guò)氧化氫蒸汽，并保持預(yù)期濃度；
滅菌階段結(jié)束后，設(shè)備自動(dòng)進(jìn)入除殘階段；
7.2.2.3 靜置階段
加藥完畢后，靜置約1 小時(shí)，使過(guò)氧化氫滅菌氣體與空氣及物體表面充分接觸，保證滅菌效果；
7.2.2.4 排殘階段
滅菌結(jié)束后，房間的排氣系統(tǒng)進(jìn)行排殘，直至過(guò)氧化氫濃度低于1ppm；（或選配過(guò)氧化氫除殘模塊，可進(jìn)行自動(dòng)除殘，直至密閉空間內(nèi)的過(guò)氧化氫濃度低于1ppm）
排殘結(jié)束后移除過(guò)氧化氫發(fā)生器及相關(guān)輔助設(shè)施。

7.3 使用注意事項(xiàng)

使用的過(guò)氧化氫溶液為35%食品級(jí)過(guò)氧化氫溶液，否則可能會(huì)影響滅菌效果；
更換儲(chǔ)液瓶中的過(guò)氧化氫溶液時(shí)必須佩戴防護(hù)手套和護(hù)目鏡，避免過(guò)氧化氫溶液飛濺到皮膚和眼睛上，造成不必要的傷害；
汽化過(guò)氧化氫氣體發(fā)生器處于通電運(yùn)行狀態(tài)或運(yùn)行停止后不久，出風(fēng)口和排氣口連接裝置及連接管路溫度較高，嚴(yán)禁觸摸。
過(guò)氧化氫發(fā)生器開(kāi)啟滅菌過(guò)程中嚴(yán)禁點(diǎn)擊【停止】、【啟動(dòng)】等按鍵，嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行操作。

備注：實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備項(xiàng)目

微生物學(xué)檢測(cè)方法：

1、常規(guī)檢測(cè)：
使用TL-V100汽化過(guò)氧化氫滅菌系統(tǒng)進(jìn)行艙體滅菌不需您改變?nèi)魏蔚某Ｒ?guī)檢測(cè)方法和步驟。通常都是使用如接觸平板法或擦拭法進(jìn)行表面檢測(cè)和其它的空氣檢測(cè)方法如沉降法。
生物指示劑菌種信息：Namsa Bacillus atrophaeus(ATCC 9372)
2、使用孢子條驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)（參考做法）：
使用器具：無(wú)菌平皿15個(gè)，無(wú)菌鑷子， TSB干粉培養(yǎng)基。
3、培養(yǎng)基無(wú)需配制：
3.1 設(shè)計(jì)孢子條放置位置，給無(wú)菌平皿編號(hào)。
3.2（此過(guò)程無(wú)菌操作）在開(kāi)始滅菌之前把孢子條字體一面朝上放在無(wú)菌平皿內(nèi)，放在指定位置，打開(kāi)平皿蓋。
3.3 開(kāi)始噴霧滅菌－－－消毒結(jié)束。
3.4（此過(guò)程無(wú)菌操作）收集各個(gè)位置的孢子條，蓋上平皿蓋。
3.5 在實(shí)驗(yàn)室工作臺(tái)內(nèi)把平皿內(nèi)的孢子條包裝打開(kāi)用無(wú)菌鑷子夾入無(wú)菌的裝有TSB無(wú)菌培養(yǎng)基的管內(nèi)，搖晃幾下使孢子條完全浸在培養(yǎng)基內(nèi)。
3.6 將陽(yáng)性對(duì)照孢子條放入培養(yǎng)基內(nèi)培養(yǎng)。
4、培養(yǎng)方法：
50-55攝氏度溫箱培養(yǎng)，24，48小時(shí)后分別觀察。
空白對(duì)照，陽(yáng)性對(duì)照，和樣本觀察培養(yǎng)基是否變渾濁，變黃。下圖為參照?qǐng)D： 芽孢條培養(yǎng)結(jié)果